Ako vypočítať CFU z riedenia

Posted on
Autor: John Stephens
Dátum Stvorenia: 25 Január 2021
Dátum Aktualizácie: 21 November 2024
Anonim
Ako vypočítať CFU z riedenia - Veda
Ako vypočítať CFU z riedenia - Veda

Obsah

CFU znamená Colony Forming Units, čo je mikrobiologický termín používaný na kvantifikáciu počtu baktérií v roztoku. V závislosti od koncentrácie vzorky musíte vykonať niekoľko riedení a rôzne vzorky umiestniť na Petriho misky. Ak máte príliš veľa bakteriálnych kolónií, je ťažké ich spočítať, a ak ich je príliš málo, vzorka nemusí byť reprezentatívna. Všeobecne je dobré naočkovať pôvodný roztok, potom riedenie 1/10 (1 diel roztoku, 9 dielov soľného roztoku), riedenie 1/100 a prípadne riedenie 1/1000.

Výpočet CFU z bakteriálneho riedenia

    Po inkubácii baktérií vykonajte predbežný počet každej misky, čo zvyčajne trvá jeden alebo dva dni. Počítajte iba jednotlivé kolónie, ktoré by mali byť zreteľné, izolované bodky, nie celá skupina rôznych kolónií pestovaných spoločne. Vyberte platňu, ktorá obsahuje viac ako 30 týchto kolónií, ale menej ako 300 kolónií.

    Spočítajte počet jednotlivých kolónií. Toto je číslo CFU vášho riedenia - na určenie CFU pôvodnej vzorky budete musieť vykonať jednoduchý výpočet. V tomto príklade použite hypotetickú platňu obsahujúcu 46 kolónií.

    Určte veľkosť použitého riedenia. (V ideálnom prípade ste si vopred označili Petriho misky.) V tomto príklade zmiešajte 1 ml bakteriálnej kultúry s 99 ml fyziologického roztoku. Toto je riedenie 1/100.

    Vynásobte stupeň riedenia čiastkou, ktorú ste skutočne naložili. Ak sa na agar nanesie 0,1 ml vášho riedenia 1/100, vynásobíte 0,1 x 1/100, čím dosiahnete výsledok 1/1000 alebo 0,001.

    Vydeľte CFU riedenia (počet kolónií, ktoré ste spočítali) výsledkom z kroku 4. V tomto príklade vypracujete 46 ÷ 1/1000, čo je rovnaké ako 46 x 1 000. Výsledkom je 46 000 CFU v pôvodnej vzorke.