Obsah
V biologických reakciách fungujú enzýmy podobne ako katalyzátory, poskytujú alternatívne cesty pre reakcie, ktoré sa vyskytujú, a urýchľujú celkový proces. Enzým pracuje v substráte a jeho schopnosť zvyšovať rýchlosť reakcie závisí od toho, ako dobre sa viaže so substrátom. Michaelisova konštanta označená KM, je miera afinity enzýmu / substrátu. Menšia hodnota znamená užšiu väzbu, čo znamená, že reakcia dosiahne svoju maximálnu rýchlosť pri nižšej koncentrácii. KM má rovnaké jednotky ako koncentrácia substrátu a je rovná koncentrácii substrátu, keď je rýchlosť reakcie na polovici svojej maximálnej hodnoty.
Plot Michaelis-Menten
Rýchlosť enzýmom katalyzovanej reakcie je funkciou koncentrácie substrátu. Na odvodenie grafu pre konkrétnu reakciu vedci pripravia niekoľko vzoriek substrátu v rôznych koncentráciách a zaznamenajú rýchlosť tvorby produktu pre každú vzorku. Graf rýchlosti (V) verzus koncentrácia () vytvára krivku, ktorá rýchlo stúpa a ustupuje pri maximálnej rýchlosti, čo je bod, v ktorom enzým pracuje tak rýchlo, ako je to možné. Toto sa nazýva saturačný pozemok alebo Michaelis-Mentenův pozemok.
Rovnica, ktorá definuje graf Michaelis-Menten, je:
V = (Vmax ) ÷ (KM +, táto rovnica sa zníži na V = Vmax ÷ 2, takže KM sa rovná koncentrácii substrátu, keď je rýchlosť polovica jeho maximálnej hodnoty. To teoreticky umožňuje prečítať KM mimo grafu. Aj keď je možné prečítať KM z pozemku Michaelis-Menten nie je ľahké alebo nevyhnutne presné. Alternatívou je vykreslenie recipročnej rovnice Michaelis-Mentenovej, ktorá je (po zmene všetkých výrazov): 1 / V = {KM/ (Vmax ×)} + (1 / Vmax) Táto rovnica má tvar y = mx + b, kde Toto je rovnica, ktorú biochemici bežne používajú na stanovenie KM, Pripravujú rôzne koncentrácie substrátu (pretože je to priamka, technicky potrebujú iba dva), vynesú výsledky a odčítajú KM priamo z grafu.Lineweaver-Burk Plot