Kalibračné krivky sa používajú na stanovenie koncentrácie neznámych látok na základe predchádzajúcich meraní roztokov známych koncentrácií. Presnosť a presnosť meraní závisí od kalibračnej krivky. Čím je krivka presnejšia, tým horšia je presnosť. Toto je typ porovnávacej metódy, neznámy sa porovnáva so známym.Kalibračné krivky sa používajú pre všetky typy meraní pomocou mnohých rôznych strojov. V tomto príklade sa používa spektrofotometer.
Zrieďte štandardný roztok na rôzne koncentrácie. Je obvyklé urobiť 10-násobné, 20-násobné, 30-násobné alebo iné kroky. Každé riedenie urobte dvakrát tak, aby všetky vzorky boli duplikované.
Vypočítajte koncentrácie zriedených roztokov. Príkladom novej koncentrácie pre 10-násobné riedenie je koncentrácia prvého roztoku vynásobená 0,10.
Odčítajte absorbanciu zriedených roztokov na spektrofotometri. Vložte kyvetu do spektrofotometra tak, aby bola značka trojuholníka zarovnaná so svetelnou cestou. Zatvorte veko spektrofotometra a stlačte nulové tlačidlo. Nulovajte prístroj destilovanou vodou každých päť vzoriek. Po vynulovaní stroja odčítajte vzorky rovnakým spôsobom. Jediným rozdielom je, že stlačíte kláves Enter a získate absorpciu. Po zatvorení veka stlačte kláves Enter. Zaznamenajte tieto hodnoty do poznámkového bloku.
Graf absorbancie verzus vypočítané známe koncentrácie pre všetky vzorky. Známe koncentrácie budú na osi X a absorbancie na osi Y. Najlepšie je vytvoriť graf v počítačovom grafickom programe.
Pomocou grafového programu môžete vypočítať regresnú čiaru pre zakreslené body. Je možné vymazať jeden z dvoch bodov pre každé riedenie, aby ste získali najlepšiu regresnú čiaru. Toto je bod, v ktorom sa každé riedenie robí dvojmo. Čím bližšia je hodnota R ^ 2, tým lepšia je regresná čiara. Poznačte si rovnicu regresnej priamky.
Na spektrofotometri odčítajte absorbanciu neznámeho koncentračného roztoku. Zaznamenajte túto absorbanciu.
Vypočítajte koncentráciu neznámeho roztoku pomocou rovnice regresnej priamky. Neznáme nasiakavosť je v rovnici nahradená ako Y. Riešite rovnicu pre X, koncentráciu.