Obsah
HPLC (vysokoúčinná kvapalinová chromatografia) a GC (plynová chromatografia) sú metódami, ktoré vedci používajú na analýzu vzoriek na určenie toho, čo vzorka obsahuje alebo koncentrácie molekúl vo vzorke. Obidva používajú ten istý princíp, že ťažšie molekuly budú eluovať alebo tečú pomalšie ako ľahšie molekuly (polarita tiež hrá úlohu v elučnom čase). Hoci je myšlienka rovnaká, GC a HPLC majú niekoľko rozdielov.
Mobilná fáza
Mobilná fáza chromatografického zariadenia je látka, ktorá pohybuje vzorkou cez stroj. V HPLC je mobilnou fázou kvapalina tvorená organickým rozpúšťadlom, ultračistou vodou a ďalšími zložkami, aby sa zabezpečila jej kompatibilita so vzorkou. GC používa plyn pre svoju mobilnú fázu. Použité plyny zahŕňajú hélium, dusík, argón alebo vodík, v závislosti od toho, čo sa analyzuje.
Stĺpce
Keď vzorky prechádzajú cez chromatografické kolóny, vzorka a mobilná fáza interagujú s obsahom kolóny, čo spôsobuje, že komponenty vzorky sa eluujú v rôznom čase. HPLC kolóny sú obvykle kovové alebo sklenené skúmavky dlhé štyri až šesť palcov, ktoré sú pevne naplnené oxidom kremičitým alebo rôznymi dĺžkami uhlíkových reťazcov. Systémy GC majú stočené kapilárne stĺpce s vnútornými stenami potiahnutými rôznymi materiálmi v závislosti od potrieb laboratórií. Ak sú stĺpce GC natiahnuté, môžu dosiahnuť dĺžku 100 stôp.
Vzorky
GC sa používa pre prchavé zlúčeniny (tie, ktoré sa rýchlo rozkladajú), zatiaľ čo HPLC je lepšia pre menej prchavé vzorky. Ak vzorka obsahuje soli alebo má náboj, musí sa analyzovať pomocou HPLC, nie GC.
Ovládanie teploty
Stĺpce GC sú umiestnené v peci vo vnútri stroja. Počas analýzy vzoriek počítač mení teplotu. Čím vyššia je teplota, tým rýchlejšia je elúcia vzorky, ale príliš vysoké teploty vedú k zlým výsledkom. HPLC kolóny sa udržiavajú pri stálej teplote (najčastejšie pri teplote miestnosti).