Obsah
- Antibiotiká a ako fungujú
- Testovanie odolnosti proti antibiotikám
- Kirby-Bauerov test
- Ako zmerať inhibičnú zónu
Baktérie sú jedny z najhojnejších organizmov na Zemi. Vedci odhadujú, že je koniec jeden bilión rôznych druhov baktérií v množstve do viac ako päť miliónov biliónov biliónov (áno, to sú dve samostatné bilióny) jednotlivcov na planéte.
Zo všetkých týchto baktérií však menej ako 1 percento spôsobiť ochorenie u ľudí. Tieto choroby sa môžu pohybovať od podráždenia žalúdka, ako sa môžete dostať od miernej infekcie, až po vážne a smrteľné choroby, ako je napríklad bubonický mor. Yersinia pestis baktérie), ktoré v 14. storočí zabili 50 miliónov ľudí.
Preto objavenie antibiotík, ktoré sú liekmi vylučujúcimi baktérie, zachránilo toľko životov. Problémy s baktériami spočíva v tom, že sa veľmi rýchlo adaptujú a vyvíjajú, čo vedie k tomu, že kmene baktérií rezistentné na antibiotiká sú čoraz častejšie. Meranie inhibičná zóna pretože kmeň baktérií môže povedať vedcom a lekárom, či je rezistentný na antibiotikum.
Antibiotiká a ako fungujú
Antibiotiká sú lieky, ktoré ničia baktérie. Fungujú tak, že zacieľujú a majú za následok smrť bakteriálnych buniek, zatiaľ čo vaše ľudské bunky zostávajú samotné. Každé antibiotikum účinkuje trochu inak, zameriava sa na štruktúry špecifické pre baktérie a signalizuje ich odstránenie.
Napríklad penicilín (jedno z najslávnejších antibiotík) interferuje s bakteriálnymi bunkovými stenami, čo vedie k tomu, že nefungujú správne, a teda umierajú. Lieky, ktoré fungujú takto, sa nazývajú beta-laktámové antibiotiká.
Makrolidové antibiotiká cieľové bakteriálne ribozómy. To bráni baktériám syntetizovať proteíny, čo znamená, že baktérie nemôžu prežiť. Bežným príkladom je erytromycín, antibiotikum, ktoré sa používa na liečenie rôznych infekcií vrátane bronchitídy a mnohých kožných infekcií.
Chinolónové antibiotiká sú ďalšie bežné typy antibiotík, ktoré pôsobia tak, že interferujú s bakteriálnou DNA.
Testovanie odolnosti proti antibiotikám
Po počiatočnom objave antibiotík v 20. rokoch si vedci rýchlo uvedomili, že baktérie sa vyvíjajú tak, aby boli voči liekom odolné. Mnoho vedcov sa potom pokúsilo vytvoriť metódy, ktoré by im umožnili testovať, ako náchylné bakteriálne kmene boli na antibiotiká, aby pochopili, s čím sa stretávajú.
Počiatočné testy zahŕňali sériové riedenia bakteriálneho bujónu rozmiestneného na doštičky s rôznymi koncentráciami antibiotika, aby sa stanovila citlivosť. Táto metóda však trvala dlho.
Kirby-Bauerov test
To je miesto, kde Kirby-Bauerov test Táto metóda bola štandardizovaná mikrobiológmi W. M. M. Kirbym a A. W. Bauerom. Ich test vezme čistú bakteriálnu kultúru a nanesie ju na agarovú platňu. Potom sa na agarovú platňu umiestni malý disk naplnený antibiotikami (vhodne nazývaný antibiotický disk). Okolo platne sa umiestnia rôzne disky s rôznymi antibiotikami a baktérie sa nechajú inkubovať určitý čas.
Po vložení disku na platňu sa antibiotiká začnú rozptyľovať. Ak sú študované baktérie citlivé na antibiotikum, potom žiadna baktéria nebude rásť v blízkosti disku, pretože bude liečbou usmrtená.
Ale ako sa vzdialite ďalej od antibiotického disku, koncentrácia antibiotika sa zníži. V určitej vzdialenosti od disku začnete znova vidieť bakteriálny rast, pretože koncentrácia antibiotík je príliš nízka na to, aby baktérie ovplyvnila.
Oblasť okolo antibiotického disku, ktorá nemá bakteriálny rast, je známa ako inhibičná zóna. Inhibičná zóna je rovnomerne kruhová zóna bez bakteriálneho rastu okolo antibiotického disku. Čím je táto zóna väčšia, tým citlivejšia je baktéria na toto antibiotikum. Čím je zóna menšia, tým je baktéria odolnejšia (a teda menej citlivá).
Ako zmerať inhibičnú zónu
Vedci Kirby a Bauer okrem pomenovania tejto praxe a protokolu vytvorili aj štandardizované grafy, ktoré používajú priemer zóny inhibície na stanovenie citlivosti alebo rezistencie baktérií na baktérie.
Tieto grafy je možné nájsť tu a na určenie toho, či sú baktérie rezistentné, stredne citlivé alebo citlivé na dané antibiotikum, používajú bakteriálne druhy, typ použitého antibiotika a zónu inhibičného priemeru.
Poznámka: Vždy zmerajte inhibičnú zónu v milimetroch.
Ak chcete zmerať inhibičnú zónu, najskôr umiestnite doštičku na nereflexný povrch. Zoberte pravítko alebo strmeň, ktorý meria v milimetroch, a vložte „0“ do stredu antibiotického disku. Merajte od stredu disku po okraj oblasti s nulovým rastom. Odmerajte v milimetroch.
Týmto sa meria polomer inhibičnej zóny. Vynásobte to dvoma, aby ste dostali priemer.
Môžete tiež zmerať priamo cez inhibičnú zónu od hrany k okraju cez stred antibiotického disku, aby ste priamo zmerali priemer namiesto merania polomeru.